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Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94kDa，具有5'→3' DNA聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，无3'→5'外切酶活性，酶延伸速度2kb/min，可以扩增长度达5kb的片段。扩增得到的PCR产物3'端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本制品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。

• 经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
  
• 经检测无外源核酸酶活性；
  
• PCR方法检测无宿主残余DNA；
  
• 能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
  
• 室温存放一个月，无明显活性改变。

• PCR反应体系(50μL)：
  
  

  成分	用量	终浓度
  10×PCR Buffer	5μL	1×
  dNTP Mix，10mM each	1μL	200μM each
  Forward Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Reverse Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μL
  Taq DNA Polymerase	0.25～0.5μL	1.25～2.5U/50μL
  ddH2O	至50μL

  
  注：
  
  • 引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
• PCR反应条件:
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	94℃	2min	1
  变性	94℃	30s	25～35个循环
  退火	55～65℃	30s
  延伸	72℃	30s
  终延伸	72℃	2min	1

  
  注：
  
  • 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
    
  • 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本制品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2kb/min。
    
  • 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。